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              第一代Sanger測序平臺




                      一代Sanger測序是基于Frederick Sanger發明的雙脫氧末端終止法對核酸序列進行檢測的技術。自從1986年第一臺基因分析儀問世以來,Sanger測序經歷了多次技術革新。

                      多通道熒光標記的毛細管電泳測序技術已經得到了普及,其原理是:將分別標記四種熒光的四種ddNTP摻入dNTPs中進行PCR擴增,由于PCR產物的每一個位置都有ddNTP的隨機摻入,而脫氧核糖上缺乏鏈延伸的3’端羥基,導致DNA鏈則在該位置終止延伸,因此經過擴增后得到了一組長度相差一個堿基的成百上千的片段,將得到的不同大小的片段進行毛細管電泳,通過對熒光的檢測,最終獲得目的片段的序列。

               

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              圖1.測序PCR產物的毛細管電泳示意圖

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              圖2. sanger測序的結果

                      Sanger測序能夠直接獲取核酸的序列信息,也是目前獲取核酸序列信息的金標準。在分子生物學研究中,對質粒、擴增子等片段的de novo測序與重測序等是很多研究工作的基礎。在臨床醫學方面,Sanger測序廣泛應用于病原體檢測、藥物基因組學檢測、腫瘤基因檢測等分子診斷領域。

                     目前,我們引進了美國Applied Systems的3500 DX(8通道)和3130(4通道)、3130xl(16通道)測序平臺。我們正在利用以上測序平臺,開展藥物基因組學、腫瘤基因檢測等多項臨床分子診斷試劑的研發,并且將逐步擴大到基礎研發、臨床科研服務等方面,為完善公司全平臺技術能力打下重要基礎。

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                                  ABI3500DX                                                      ABI3130                                                     ABI3130XL

               

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